Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒
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儲存條件 | -20℃,避光,有效期1年 |
規(guī)格 | 500T |
單位 | 盒 |
產(chǎn)品說明:
Calcein-AM 是一種對活細胞進行熒光標(biāo)記的細胞染色試劑,發(fā)綠色熒光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在傳統(tǒng)的 Calcein(鈣黃綠素)基礎(chǔ)上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基團,增加了疏水性,使其能夠輕易穿透活細胞膜。一旦進入細胞后,Calcein-AM(本身不發(fā)熒光)被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子 Calcein,從而被滯留在細胞內(nèi)并發(fā)出強綠色熒光。與其它同類試劑(如 BCECF-AM 和 CFDA)相比,由于 Calcein, AM 細胞毒性極低,是適合用于活細胞染色的熒光探針,而且不會抑制任何的細胞功能,如增殖和淋巴球的趨化性。
由于死細胞缺乏酯酶,Calcein-AM 僅用于對活細胞的細胞生存能力測試和短期標(biāo)記。因此,Calcein-AM 常常與死細胞熒光探針如碘化丙啶(PI)等聯(lián)合使用,同時進行活細胞和死細胞的熒光雙重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿過活細胞的細胞膜,僅能穿過死細胞膜的無序區(qū)域而到達細胞核,并嵌入細胞的 DNA 雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI 僅對死細胞染色。由于 Calcein 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時觀察活細胞和死細胞。而用 545 nm 激發(fā),僅可觀察到死細胞。
本試劑盒的工作原理就在于 Calcein-AM 和 PI 的雙重染料,來進行活細胞和死細胞的雙重染色標(biāo)記,從而進行活細胞和死細胞水平的分析。根據(jù)我司優(yōu)化的實驗體系,單次就 200µl 細胞懸液進行染色,可以做 500 次檢測