Product classification
糖原系列
糖異生系列
其他系列
信號系列
土壤系列
離子系列
淀粉系列
蛋白酶系列
蔗糖系列
線粒體呼吸鏈系列
抗逆系列
抗氧系列
氧化系列
P450系列
糖代謝系列
脂肪酸代謝系列
酯酶系列
TCA系列
三羧酸循環(huán)系列
氮代謝系列
輔酶II 系列
谷胱甘肽系列
蛋白含量測定系列
糖酵解系列
維生素c代謝系列
過氧化氫系列
氨基酸代謝系列
ATP系列
輔酶I系列
Relevant Articles
柱式法提取細胞 RNA 試劑盒
貨號:R1250
規(guī)格:50T/100T
保存:室溫(15℃-25℃)干燥保存,有效期 1 年。2℃-8℃保存時間更長。
注意:使用前請先在結(jié)合液中加入異丙醇,漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。
產(chǎn)品簡介:
該試劑盒對經(jīng)典的異硫氰酸胍抽提 RNA 的方法進行了改良。改良后的裂解液能迅速裂解細胞,釋放出 RNA 的同時滅活 RNase。RNA 在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜上,再通過一系列漂洗和離心等步驟進一步將蛋白等雜質(zhì)去除,最后用 RNase-Free ddH2O 將 RNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。本試劑盒操作快速便捷,安全無需使用酚、氯仿等有毒試劑,操作安全。
操作步驟:
1、細胞裂解取 1*106~7 個細胞,每管加入 500ul 裂解液 A,加入 50ul 溶液 B 用移液槍吹打混勻,RT 放置 5min。
2、向離心管中加入 700μl 結(jié)合液 C(使用前請先檢查是否已加入異丙醇),上下顛倒充分混勻。
3、向吸附柱中加入 600ul 混合液,靜置 1min。4℃ 12000rpm 離心 1min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管(收集管留下,用于步驟 5 使用)中。
備注:由于體積過大,需二次上柱,再將剩余混合液重復步驟 3
4、將吸附柱放到新的干凈的 2ml 收集管上,在吸附柱中加入 500μL RNA 洗脫液,4℃,12000rpm 離心 2min,收集濾液,扔掉吸附柱。
5、在濾液中加入 700μl 結(jié)合液,用移液槍吹打混勻后加入到新的吸附柱中,(使用步驟 3 的收集管),4℃,12000rpm 離心 2min,棄濾液。
備注:由于體積過大,需二次上柱,再將剩余混合液重復步驟 5
6、向離心管中加入 600μL 漂洗液 1(使用前請確認是否已加入無水乙醇),靜置1min,4℃,12000rpm 離心 1min,棄濾液。
7、向離心管中加入 600μL 漂洗液 2(使用前請確認是否已加入無水乙醇),4℃,12000rpm 離心 1min,棄濾液。
8、4℃,12000rpm 離心 2min,將吸附柱敞口室溫放置 3min,以除去多余的乙醇。
9、將吸附柱放到一個干凈的離心管上,向吸附柱中加入 30-100μL 洗脫液,室溫放置 2min,4℃,12000rpm 離心 2min,得到 RNA 溶液,RNA 保存于-80℃。
注意事項:
1、所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為 RNase-free 產(chǎn)品,操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中 RNA 酶污染樣品。
2、洗脫液的體積不應(yīng)少于 30μL,體積過少會影響提取效率,RNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-80℃,以防 RNA 降解。
3、RNA 濃度及純度檢測:提取的 RNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260/OD280 比值應(yīng)為 2.0-2.2。
備注:106 細胞樣品,用 50μL RNase-free ddH2O 洗脫。