該如何使用OCT冰凍切片包埋劑看完本篇你就知道了
更新時間:2023-06-23 | 點擊率:8016
OCT(Optimal Cutting Temperature)冰凍切片包埋劑是一種用于保存組織樣本并進(jìn)行快速冷凍切片的工具。
以下是使用OCT冰凍切片包埋劑的基本步驟:
1.準(zhǔn)備組織樣本:將需要研究的組織樣本取出,并在無菌條件下進(jìn)行處理和固定,例如用緩沖液或福爾馬林溶液進(jìn)行固定。
2.制備OCT包埋劑:將OCT包埋劑從-20℃冷藏中取出,并在常溫下靜置15-30分鐘使其恢復(fù)至室溫下。然后,將OCT包埋劑倒入一個已經(jīng)準(zhǔn)備好的包埋模具中,讓其平均分布。
3.冷凍組織樣本:將固定好的組織樣本迅速轉(zhuǎn)移到OCT包埋劑中,應(yīng)盡量避免氣泡產(chǎn)生。然后,將樣本與OCT包埋劑一起放入干燥冰鹽混合物中,使其迅速冷凍。
4.包埋組織樣本:待樣本冷凍后,將OCT包埋劑及其中的組織樣本從冰鹽混合物中取出,并迅速安置到預(yù)先準(zhǔn)備好的組織包埋模具中。確保樣本位置正確、不斷口和方向一致,使其能夠被正確地切割。
5.再次冷凍:將組織樣本再次放回到干燥冰鹽混合物中,并迅速冷凍至-70℃左右。這有助于保持樣本和OCT包埋劑的完整性和穩(wěn)定性。
6.切割樣本:使用特制的微型切片機(jī)將已經(jīng)包埋的組織樣本進(jìn)行切割,厚度可根據(jù)需要進(jìn)行調(diào)整。在此過程中,應(yīng)謹(jǐn)慎避免樣本移位或損壞。
7.保存樣本:將切割好的樣本用無菌保存介質(zhì)(例如PBS)沖洗后,置于-80℃或液氮中保存。這樣可以長期保存樣本并保持其完整性和質(zhì)量。
總之,OCT冰凍切片包埋劑是一個方便、快速而可靠的工具,適用于各種生物組織的研究。在使用時,需要注意無菌操作,并嚴(yán)格按照生產(chǎn)廠家提供的說明進(jìn)行操作,以確保樣本和數(shù)據(jù)的可靠性和準(zhǔn)確性。