胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠 4B 說明書
更新時(shí)間：2010-04-21 | 點(diǎn)擊率：2919
胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠 4B
一、 簡介
本公司生產(chǎn)的胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B是把高純度的胰蛋白酶固定到活化好的瓊脂糖凝膠上，它可以用于酶切，同時(shí)也可以可以純化一些能和它結(jié)合的物質(zhì)，如絲氨酸蛋白酶抑制劑等。
二、 親和填料特性：
| 特點(diǎn) | 基團(tuán)脫落少，結(jié)合特異性強(qiáng) |
| 配基 | 胰蛋白酶 |
| 配基密度 | ≤10mg/ml |
| 親和填料的顆粒大小 | 45-165μm |
| 大流速 | 300cm/h |
| pH范圍 | 1.5-10，在位清洗時(shí)pH范圍可到1.5-10 |
| 使用溫度 | 4℃~常溫 |
| 保存溫度 | +4~8℃ |
| 保存液體 | 20%乙醇 |
三、 適用范圍:
胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B用于純化各種于之結(jié)合的物質(zhì)，如酶抑制劑等。
四、 親和填料應(yīng)用的注意事項(xiàng)：
1、凝膠從冷室或冰箱中取出后好在室溫下緩慢振搖恢復(fù)到室溫，然后再裝柱，以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
2、吸附：20-50mM,pH7.4-8.0含0.2-0.5M NaCL的緩沖液，常用的為Tris-HCl緩沖液。
3、洗脫：可以用濃度為0.2-2M 的pH1.5-5左右的酸性緩沖液進(jìn)行階段或者線性洗脫。
4、上樣樣品必須與平衡柱子的緩沖液的pH、電導(dǎo)相同。
5、不同的樣品，吸附和洗脫方法不相同，可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行。
6、胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B親和填料的再生處理方法：先用0.1M Tris-HClpH7.0緩沖液洗3個(gè)柱床體積，然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3個(gè)床體積,后用3M NaCL洗 3個(gè)床體積即可。如果再生的效果還不好，也可以用0.2-0.5M pH1.5的緩沖液沖洗3-5個(gè)柱床體積，然后再用水清洗，保存在20%乙醇中即可。長期不用好加抑菌劑如0.2%疊氮鈉,酸洗柱子的時(shí)間不能太長，否則會縮短填料的壽命。
7、該親和填料保存條件為20%乙醇，+4~8℃。